Korelace genotypu, fenotypu a hladiny mRNA u vybraných nervosvalových poruch


Autoři: J. Sedláčková;  K. Stehlíková;  Z. Hrubá;  B. Jeřábková;  E. Zapletalová;  L. Fajkusová
Působiště autorů: Centrum molekulární biologie a genové terapie FN, Brno sedlackovaj@fnbrno. cz
Vyšlo v časopise: Čas. Lék. čes. 2008; 147: 179
Kategorie: Sjezdy

Molekulárně genetická analýza byla provedena u pacientů s diagnózou Duchennovy/Beckerovy svalové dystrofie (DMD) a pletencové svalové dystrofie typu 2A (LGMD2A). DMD je spojena s mutacemi v genu pro dystrofin, LGMD2A s mutacemi v genu pro kalpain-3. Výsledky molekulárně genetické analýzy byly porovnány s výsledky imunohistochemické analýzy proteinů ve svalové tkáni a s klinickými projevy pacienta.

Metody. Molekulárně genetická analýza mRNA a DNA genu DMD a CAPN3 metodami reverzní transkripce, amplifikace, PTT (Protein Truncation Test) a sekvenční analýzy DNA; u pacientů s geneticky potvrzenou diagnózou DMD/BMD nebo LGMD2A analýza hladiny mRNA genu pro dystrofin resp. kalpain-3 metodou real-time PCR a vyhodnocení komparativní metodou pro relativní kvantifikaci.

Výsledky. Bylo potvrzeno, že nalezený genotyp souvisí s klinickými projevy onemocnění, tzn., že mutace měnící čtecí rámec translace jsou spojeny s podstatně závažnějším průběhem choroby. V případě DMD/BMD byli nalezeni pacienti, u kterých genetická analýza odhalila mutaci měnící čtecí rámec translace, ale výsledný fenotypový projev byl mírnější, než by odpovídalo nalezené mutaci. U těchto případů byly v souvislosti s detekovanou mutací nalezeny alternativní sestřihy mRNA, které způsobily obnovení čtecího rámce, popř. předpokládáme, že došlo k iniciaci nového počátku translace. Podobně jako klinické projevy i výsledky imunohistochemické analýzy u těchto pacientů odpovídaly mírnější formě nemoci, tj., byly detekovány úsekovité výpadky popř. oslabení dystrofinu. Výsledky genetické a imunohistochemické analýzy byly korelovány s hladinou mRNA sledovaných genů. Bylo zjištěno, že výsledná hladina mRNA souvisí s typem detekované mutace, tj., že transkripty s mutací vytvářející předčasný terminační kodon jsou degradovány mechanismem nonsensemediated mRNA decay.

Práce byla podporována grantem IGA MZ ČR 1A/8608-4.


Štítky
Adiktologie Alergologie a imunologie Angiologie Audiologie a foniatrie Biochemie Dermatologie Dětská gastroenterologie Dětská chirurgie Dětská kardiologie Dětská neurologie Dětská otorinolaryngologie Dětská psychiatrie Dětská revmatologie Diabetologie Farmacie Chirurgie cévní Algeziologie Dentální hygienistka
Článek CytoChip

Článek vyšel v časopise

Časopis lékařů českých


Nejčtenější v tomto čísle
Kurzy

Zvyšte si kvalifikaci online z pohodlí domova

hyperpigmentace úvodní foto kurz
Efektivní redukce hyperpigmentace − od výzkumu k inovacím pro praxi
nový kurz
Autoři: dr. Ludger Kolbe, dr. Thierry Passeron, MD, PhD

zveme Vás k zapojení se do videokurzu s tématem Co je a není FENO? Nadhodnocené FENO a podhodnocené eozinofily v krvi u astmatu.
Autoři: doc. MUDr. Petr Čáp, Ph.D.

Postavení moxonidinu a indapamidu v léčbě hypertenze
Autoři: MUDr. Jan Vachek

Magnetická rezonance a diagnostika axiálních spondyloartritid - Virtuální trénink
Autoři: MUDr. Leona Procházková, Ph.D., MUDr. Monika Gregová, Ph.D., MUDr. Vladimír Červeňák, MUDr. Eva Korčáková, Ph.D.

Hybridní zubní náhrady – přežitek nebo perspektiva v moderní protetické péči?
Autoři: doc. MUDr. Hana Hubálková, Ph.D.

Všechny kurzy
Kurzy Podcasty Doporučená témata Časopisy
Přihlášení
Zapomenuté heslo

Nemáte účet?  Registrujte se

Zapomenuté heslo

Zadejte e-mailovou adresu, se kterou jste vytvářel(a) účet, budou Vám na ni zaslány informace k nastavení nového hesla.

Přihlášení

Nemáte účet?  Registrujte se