Endokanabinoidný systém a kosť


The endocannabinoid system and bone

Recent studies suggest an important role for the skeletal endocannabinoid system in the regulation of bone mass in both physiological and pathological conditions. Both major endocannabinoids (anandamid and 2-arachidonoylglycerol), endocannabinoid receptors – CB1-receptor (CB1R) a CB2-receptor (CB2R) and the endocannabinoid metabolizing enzymes are present or expressed in osteoblasts and osteoclasts. Previous studies identified multiple risk and protective variants of CNR2 gene dealing with the relationship to bone density and/or osteoporosis. Selective CB1R/ CB2R-inverse agonists/antagonists and CB2R-inverse agonists/antagonists are candidates for prevention of bone mass loss and combined antiresorptive and anabolic therapy for osteoporosis.

Key words:
cannabinoid receptors – endocannabinoids – marijuana – osteoporosis


Autoři: Mikuláš Pura 1,2,3;  Peter Vaňuga 1
Působiště autorů: Národný endokrinologický a diabetologický ústav, Ľubochňa, Slovenská republika 1;  Endokrinologická ambulancia, Ružomberok, Slovenská republika 2;  Endokrinologická ambulancia, Poliklinika Novamed, Banská Bystrica, Slovenská republika 3
Vyšlo v časopise: Vnitř Lék 2016; 62(Suppl 3): 99-102
Kategorie: Přehledné referáty

Souhrn

Pribúdajú dôkazy o tom, že kostný endokanabinoidný systém zohráva dôležitú úlohu v regulácii kostnej hmoty za fyziologických aj patologických podmienok. Oba hlavné endokanabinoidné ligandy (anandamid aj 2-arachidonoylglycerol), receptory endokanabinoidného systému – CB1-receptor (CB1R) a CB2-receptor (CB2R) a kľúčové enzýmy ich syntézy a degradácie sa nachádzajú, resp. sú exprimované v osteoblastoch aj osteoklastoch. Doterajšie štúdie génu CNR2 identifikovali viaceré rizikové a protektívne varianty sekvencie génu vo vzťahu ku kostnej hustote, resp. k osteoporóze. Selektívne CB1R-inverzní agonisti/antagonisti, resp. CB2R-inverzní agonisti/antagonisti sú kandidáti na prevenciu straty kostnej hmoty a kombinovanú antirezorpčnú a osteoformačnú liečbu osteoporózy.

Kľúčové slová:
endokanabinoidy – kanabinoidné receptory – marihuana – osteoporóza

Úvod

V odbornej literatúre z posledného obdobia je možné nájsť množstvo excelentných prehľadových článkov týkajúcich sa histórie, biochémie, farmakológie a liečebného potenciálu endokanabinoidného systému [1–5]. V skratke, tento tvoria:

  • receptory endokanabinoidného systému (CB-receptory) – CB1-receptor (CB1R) kódovaný génom CNR1 (lokus 6q15) a CB2-receptor (CB2R) kódovaný génom CNR2 (lokus 1p36)
  • ligandy – endokanabinoidy (týmito sú najmä N-arachidonoyletanolamín – AEA, syn. anandamid a 2-arachidonylglycerol  – 2-AG)
  • syntetizujúce a degradačné enzýmy

Anandamid (zo sanskritského slova ananda – vnútorná blaženosť) vzniká jednak N-acyl-fosfatidyl-etanolamín-fosfolipáza D (NAPE-PLD)-dependentnou a independentnou cestou, jeho hlavným degradačným enzýmom je amidohydroláza mastných kyselín (FAAH). 2-AG vzniká z inozitol-fosfolipidov pod vplyvom fosfolipázy C a diacylglycerolipáz (DAGLα a DAGLβ), degraduje sa monoacylglycerol-lipázou (MAGL) [6].

Hlavná aktívna zložka konope siatej (Cannabis sativa var. indica, syn. marihuana) (obr. 1) [7] – ∆9-tetrahydrokanabinol (THC) sa viaže na oba receptory endokanabinoidného systému. Všadeprítomnosť CB1R a CB2R je dôvodom, prečo psychoaktívne účinky, pre ktoré je marihuana najčastejšou zneužívanou látkou, nie sú jedinými účinkami, a už tisíce rokov sa marihuana pestuje a liečebne využíva (okrem množstva ďalších účinkov) napr. na utíšenie bolesti, utlmenie zápalu a ako sedatívum [6]. Prvá písomná zmienka pochádza z Číny, z najstaršieho dochovaného čínskeho liekopisu Šennong Bĕn Căo Jing (Materia Medica Božského sedliaka), z rokov 200–250 nášho letopočtu [6].

Konopa siata (Cannabis sativa) vo vyobrazení Franza Eugena Köhlera z roku 1887
Obr. 1. Konopa siata (Cannabis sativa) vo vyobrazení Franza Eugena Köhlera z roku 1887

V nasledujúcom prehľade sa venujeme kostnému endokanabinoidnému systému ako potencionálnemu terapeutickému cieľu u pacientov s osteoporózou, resp. inými kostnými poruchami.

Kostný endokanabinoidný systém

Oba endokanabinoidné ligandy a kľúčové enzýmy ich syntézy a degradácie sa nachádzajú, resp. sú exprimované v osteoblastoch aj osteoklastoch, z čoho vyplýva, že anandamid aj 2-AG sa tvoria lokálne v kostiach. 2-AG nemá priamym pôsobením cez CB1R na osteoblasty žiadny vplyv, resp. účinkuje ako inverzný agonista. Cez CB1R kontroluje funkciu osteoblastov inhibíciou uvoľňovania noradrenalínu zo sympatikových zakončení v okolí osteoblastov (obr. 2). Noradrenalín potláča osteo­formáciu väzbou na β2-adrenergný receptor [8]. V kostiach CB2R-selektívne agonisticky pôsobiaci anandamid in vitro stimuluje proliferáciu osteoblastov a zvyšuje aj počet osteoklastov. Pri štúdiách so zvieracími modelmi sa zistilo, že kostné fenotypy CB1R aj CB2R „knockoutovaných“ myší závisia od konkrétnej kmeňovej línie pokusných zvierat alebo vytvorenej z mutácie. Odstránenie 233 terminálnych kodónov z N-konca má pohlavne-dependentný efekt – samičky majú normálnu trabekulárnu kosť s mierne rozšírenou kortikálnou kosťou, kým samčekovia línie CD1 (CD1CB1-/-) majú kostnú hustotu zvýšenú [9,10]. Normálne parametre osteoformácie a osteorezorpcie svedčia o tom, že u oboch pohlaví vzniká samčí kostný fenotyp. Rovnaké výsledky s identickou mutáciou sa dosiahli aj pri kmeňovej línii ABH [11,12]. Naopak, odstránenie takmer celej proteín-kódujúcej sekvencie u myší línie C57BL6J (C57CB1-/-) viedlo u oboch pohlaví k zníženej kostnej hustote, zvýšeniu počtu osteoklastov a zníženej osteoformácii [10]. Kostný fenotyp u C57CB2-/- myší je nezávislý od pohlavia. Počas prvých 2–3 mesiacov života dosahuje trabekulárna kosť normálne prírastky, ale s narastajúcim vekom dochádza k výraznej strate kostnej hmoty. Vo veku jeden rok je kostná hustota v porovnaní s kontrolami polovičná [13]. C57CB2-/- myši majú veľký kostný obrat so zvýšenou osteorezorpciou aj osteo­formáciou s negatívnou bilanciou [13], čím sa zmeny podobajú postmenopauzálnej osteoporóze [14].

Model regulácie osteoformácie interakciou interakciou sympatikových zakončení a CB1-receptorov. Upravené podľa [31]
Obr. 2. Model regulácie osteoformácie interakciou interakciou sympatikových zakončení a CB1-receptorov. Upravené podľa [31]

Dôležitým zistením je, že znížená kostná hustota je u týchto myší jediným doteraz zisteným fenotypovým prejavom. Keďže C57CB2-/- myši sú inak zdravé, zdá sa, že hlavnou fyziologickou úlohou CB2R je udržiavanie rovnováhy kostného obratu. Mladé samičky CD1CB2-/- majú s porovnaní s wt-myšami naopak nízky kostný obrat a nadštandardnú trabekulárnu kostnú hmotu. S narastajúcim vekom osteoformácia klesá a vo veku jedného roka nie je oproti wt-myšiam rozdiel v hustote trabekulárnej kosti. Týmto sa líšia oproti fenotypu myší C57CB2-/-. U samčekov je kostný fenotyp trabekulárnej kosti nezmenený. Kortikálna kosť u myší oboch pohlaví sa nelíši od wt-myší. Sumárne možno povedať, že:

  • CB1R regulujú osteorezorpciu u dospelých myší
  • v podmienkach zvýšeného kostného obratu môžu CB1R regulovať stratu kostnej hmoty
  • deficit CB1/CB2 má špecifický dopad v závislosti od typu kosti (trabekulárna vs kortikálna) a pohlavia, zmeny kostnej hustoty postihujú najviac trabekulárnu kosť a sú ovplyvnené genetickými rozdielmi medzi kmeňovými líniami študovaných myší [15]

Zvýšenú kostnú hustotu vďaka poruche osteoklastogenézy pri nepostihnutom množstve osteoblastov majú aj dospelé myši bez receptorov GPR55 [16]. Tieto sa pokladajú za možný 3. typ endokanabinoidných receptorov [17,18]. Kostné abnormality GPR55-/- myší sa veľmi podobajú zmenám u CB1-/- myší [11], na základe čoho sa predpokladá, že receptor GPR55 je súčasťou regulácie účinku endokanabinoidov pri osteorezorpcii [19].

Čiastočnou odpoveďou na otázku, či rozdiely vo výsledkoch štúdií medzi kmeňovými líniami študovaných myší s modelmi deficitov CB1/CB2 možno analogicky očakávať aj u ľudí, sú štúdie polymorfizmov génov kódujúcich CB1R (gén CNR1, lokus 6q15) a najmä CB2R (gén CNR2, lokus 1p36). Práve lokus 1p36 vo viacerých nezávislých starších štúdiách preukázal spojitosť s rizikom zníženej kostnej hustoty a osteoporózy [20,22–25]. Na krátkom ramienku sa nachádzajú viaceré gény, ktorých zmeny sa spájajú s rizikom zníženej kostnej hustoty – gén ALPL pre tkanivovo-nešpecifický izoenzým alkalickej fosfatázy podmieňujúci adultnú a detskú formu hypofosfatázy, gén MTHFR pre metyltetrahydrofolátreduktázu podmieňujúci homocysteinémie, gén PLOD1 pre prokolagén-lyzín, 2-oxoglutarát 5-dioxygenázu 1 podmieňujúci Ehlersov-Danlosov syndróm typ VI a gén HSPG2 pre špecifický heparansulfát proteoglykán jadrový proteín bazálnej membrány podmieňujúci Schwartov-Jampelov syndróm typ 1 [25]. Ani v jednej zo štúdií však nebol ako kandidátny gén identifikovaný gén CNR2. Doterajšie asociačné štúdie jediného kódujúceho exónu génu CNR2 realizované v kaukazoidnej/evropoidnej [26] aj mongoloidnej [27–29] populácii zhodne identifikovali viaceré rizikové a protektívne varianty sekvencie génu vo vzťahu ku kostnej hustote/k etiológii osteoporózy u ľudí [26–29].

Endokanabinoidné receptory regulujú osteoklastogenézu aj nepriamo – ovplyvňovaním spriahnutia procesov osteoformácie a osteorezorpcie (tzv. coupling phenomenon). Tvorba osteoklastov je výrazne nižšia v kultúrach kostnej drene, v ktorých boli osteoblasty pripravené z CB1-/- myší [20,21]. Dôvodom je nižšia expresia RANKL na osteo­blastoch, v dôsledku čoho sú osteoblasty menej schopné stimulovať aktiváciu a novotvorbu osteoklastov [20]. Špecifickí CB2R-agonisti HU-308, HU-433 a JWH133 zmierňujú stratu kostnej hmoty u ovarektomovaných zvierat [12,13,30]. CB1R/CB2R-špecifické ligandy (selektívne CB1R-inverzní agonisti/antagonisti, resp. CB2R-inverzní agonisti/antagonisti) bez výskytu vedľajších psychických účinkov sú preto kandidáti na prevenciu straty kostnej hmoty a kombinovanú antirezorpčnú a osteoformačnú liečbu osteoporózy (schéma) [19,31].

Schéma. Model prevencie a liečby osteoporózy s použitím kanabinoidných ligandov. Upravené podľa [19]
Schéma. Model prevencie a liečby osteoporózy s použitím kanabinoidných ligandov. Upravené podľa [19]

Záver

Množstvo otázok týkajúcich sa pôsobenia „endo­kanabinoidómu“, tj. systému aktuálne s >100 metabolitmi a > 25 proteínmi, ostáva otvorených. Pribúdajú dôkazy o tom, že kostný endokanabinoidný systém zohráva dôležitú úlohu v reguláciu kostnej hmoty za fyziologických aj patologických podmienok. Trestnosť prechovávania a užívania marihuany vo väčšine krajín limituje údaje z klinických štúdií a údaje týkajúce sa THC sú tak vo veľkej miere založené na retrospektívnych dátach, kazuistických popisoch a zvieracích modeloch. Rozchádzajú sa názory laickej, ako aj odbornej verejnosti na postavenie marihuany v rebríčku drôg. Treba podotknúť, že v porovnaní s marihuanou je dopad iných spoločensky široko rozšírených drôg (alkohol, nikotín) hodnotený sumárom ujmy užívateľa a spoločnosti omnoho väčší [32–35], nehovoriac o tom, že ich liečebný potenciál je nulový.

Objavy nových látok ako napr. fluorofor-konjugovanej CB2R-selektívnej zlúčeniny CM-157 (3-[[4-[2-tert-butyl-1-(tetrahydropyran-4-ylmetyl)benzimidazol-5-yl]sulfonyl-2-pyridyl]oxy]propán-1-amín) čoskoro umožnia farmakologickú charakteristiku CB2R [36] a uľahčia vývoj selektívnych agonistov CB-receptorov so sľubným potenciálom v liečbe osteoporózy.

Legendárny Šen Nung – Božský sedliak, praotec Číňanov a Vietnamcov, žil údajne v rokoch 2 838–2 698 p. n. l. (tj. úctyhodných 140 rokov!), podľa inej legendy dokonca až božských 5 000 rokov. Ani jeden z uvedených číselných údajov dlhovekosti nedosiahne ani jeden z nás, či už s alebo bez ovplyvnenia svojho endokrinného a endo­kanabinoidného systému endo- či exo(fyto)kanabinoidmi. Veríme však tomu, že jubilujúci 80ročný prof. Zamrazil, legenda českej a slovenskej endokrinológie, bude ešte dlho Šen Nungovi šliapať na päty.

Venované prof. MUDr. Václavovi Zamrazilovi, DrSc., pre ktorého sú hormóny drogou.

prim. MUDr. Peter Vaňuga, CSc.

peter.vanuga@nedu.sk

Endokrinologické oddelenie, Národný endokrinologický a diabetologický ústav, Ľubochňa, Slovenská republika

www.nedu.sk

Doručeno do redakce 6. 9. 2016

Přijato po recenzi 17. 9. 2016


Zdroje

1. Bab I, Zimmer A, Melamed E. Cannabinoids and skeleton: from marijuana to reversal of bone loss. Ann Med 2009; 41(8): 560–567. Dostupné z DOI: <http://dx.doi.org/10.1080/07853890903121025>.

2. Lambert DM, Fowler CJ. The endocannabinoid system: drug targets, lead compounds, and potential therapeutic applications. J Med Chem 2005; 48(16): 5059–5087.

3. Pertwee RG. Cannabinoid pharmacology: the first 66 years. Br J Pharmacol 2006; 147(Suppl 1): S163-S171.

4. Kogan NM, Mechoulam R. Cannabinoids in health and disease. Dialogues Clin Neurosci 2007; 9(4): 413–430.

5. Marx J. Drug development. Drugs inspired by a drug. Science 2006; 311(5759): 322–325.

6. Fattore L (ed). Canabinoids in neurologic and mental disease. Elsevier: San Diego 2015. ISBN 978–0124170414

7. Köhler FE. Medizinal-Pflanzen in naturgetreuen Abbildungen mit kurz erläuterndem Texte. Gera-Untermhaus: 1887. Dostupné z WWW: Dostupné z DOI: http://www.botanicus.org/item/31753002839139.

8. Raphael B, Gabet Y. The skeletal endocannabinoid system: clinical and experimental insights. J Basic Clin Physiol Pharmacol 2016; 27(3): 237–245. Dostupné z DOI: <http://dx.doi.org/10.1515/jbcpp-2015–0073>.

9. Ledent C, Valverde O, Cossu G et al. Unresponsiveness to cannabinoids and reduced addictive effects of opiates in CB1 receptor knockout mice. Science 1999; 283(5400): 401–404.

10. Tam J, Ofek O, Fride E et al. Involvement of neuronal cannabinoid receptor CB1 in regulation of bone mass and bone remodeling. Mol Pharmacol 2006; 70(3): 786–792.

11. Idris AI, van’t Hof RJ, Greig IR et al. Regulation of bone mass, bone loss and osteoclast activity by cannabinoid receptors. Nat Med 2005; 11(7): 774–779.

12. Bab I, Ofek O, Tam J et al. Endocannabinoids and the regulation of bone metabolism. J Neuroendocrinol 2008; 20(Suppl 1): S69-S74. Dostupné z DOI: <http://dx.doi.org/10.1111/j.1365–2826.2008.01675.x>.

13. Ofek O, Karsak M, Leclerc N et al. Peripheral cannabinoid receptor, CB2, regulates bone mass. Proc Natl Acad Sci 2006; 103(3): 696–701.

14. Brown JP, Delmas PD, Malaval L et al. Serum bone Gla-protein: a specific marker for bone formation in postmenopausal osteoporosis. Lancet 1984; 1(8386): 1091–1093.

15. Sophocleous A, Idris AI, Ralston SH. Genetic background modifies the effects of type 2 cannabinoid receptor deficiency on bone mass and bone turnover. Calcif Tissue Int 2014; 94(3): 259–268. Dostupné z DOI: <http://dx.doi.org/10.1007/s00223–013–9793–8>.

16. Whyte LS, Rynerg E, Sims NA et al. The putative cannabinoid receptor GPR55 affects osteclast function in vitro and bone mass in vivo. Proc Natl Acad Sci 2009; 106(38): 16511–16516. Dostupné z DOI: <http://dx.doi.org/10.1073/pnas.0902743106>.

17. Ryberg E, Larsson N, Sjogren S et al. The orphan receptor GPR55 is a novel cannabinoid receptor. Br J Pharmacol 2007; 152(7): 1092–1101.

18. Begg M, Pacher P, Batkai S et al. Evidence for novel cannabinoid receptors. Pharmacol Ther 2005; 106(2): 133–145.

19. Idris AI. Cannabinoid receptors as target for treatment of osteoporosis: a tale of two therapies. Curr Neuropharmacol 2010; 8(3): 243–253. Dostupné z DOI: <http://dx.doi.org/10.2174/157015910792246173>.

20. Idris AI, Sophocleous A, Landao-Bassonga E et al. Cannabinoid receptor type 1 protects against age-related osteoporosis by regulating osteoblast and adipocyte differentiation in marrow stromal cells. Cell Metab 2009; 10(2): 139–147. Dostupné z DOI: <http://dx.doi.org/10.1016/j.cmet.2009.07.006>.

21. Idris AI, Sophocleous A, Landao-Bassonga E et al. Regulation of bone mass, osteoclast function, and ovariectomy-induced bone loss by the type 2 cannabinoid receptor. Endocrinology 2008; 149(11): 5619–5626. Dostupné z DOI: <http://dx.doi.org/10.1210/en.2008–0150>.

22. Devoto M, Shimoya K, Caminis J et al. First-stage autosomal genome screen in extended pedigrees suggests genes predisposing to low bone mineral density on chromosomes 1p, 2p and 4q. Eur J Hum Genet 1998; 6(2): 151–157.

23. Devoto M, Specchia C, Li HH et al. Variance component linkage analysis indicates a QTL for femoral neck bone mineral density on chromosome 1p36. Hum Mol Genet 2001; 10(21): 2447–2452.

24. Devoto M, Spotila LD, Stabley DL et al. Univariate and bivariate variance component linkage analysis of a whole-genome scan for loci contributing to bone mineral density. Eur J Hum Genet 2005; 13(6): 781–788.

25. Valdéz-Flores M, Casas-Avila L, Ponce de León-Suárez V. Genetic diseases related wih osteoporosis. In: Valdéz-Flores M (ed). Topics in osteoporosis. In Tech. Dostupné z WWW: http://www.intechopen.com/books/howtoreference/topics-in-osteoporosis/genetic-diseases-related-with-osteoporosis.

26. Karsak M, Cohen-Solal M, Freudenberg J et al. Cannabinoid receptor type 2 gene is associated with human osteoporosis. Hum Mol Genet 2005; 14(22): 3389–3396.

27. Yamada Y, Ando F, Shimokata H. Association of candidate gene polymorphisms with bone mineral density in community-dwelling Japanese women and men. Int J Mol Med 2007; 19(5): 791–801.

28. Zhang C, Ma J, Chen G et al. Evaluation of common variants in CNR2 gene for bone mineral density and osteoporosis susceptibility in postmenopausal women of Han Chinese. Osteoporosis Int 2015; 26(12): 2803–2810. Dostupné z DOI: <http://dx.doi.org/10.1007/s00198–015–3195-x>.

29. Woo JH, Kim H, Kim JH et al. Cannabinoid receptor genepolymorphisms and bone mineral density in Korean postmeonpausal women. Menopause 2015; 22(5): 512–519. Dostupné z DOI: <http://dx.doi.org/10.1097/GME.0000000000000339>.

30. Smoum R, Baraghithy S, Chourasia M et al. CB2 cannabinoid receptor agonist enantiomers HU-433 and HU-308: an inverse relationship between binding affinity and biological potency. Proc Natl Acad Sci USA 2015; 112(28): 8774–8779. Dostupné z DOI: <http://dx.doi.org/10.1073/pnas.1503395112>.

31. Raphael B, Gabet Y. The skeletal endocannabinoid system: clinical and experimental insights. J Basic Clin Physiol Pharmacol 2016; 27(3): 237–245. Dostupné z DOI: <http://dx.doi.org/10.1515/jbcpp-2015–0073>.

32. Nutt D, King LA, Saulsbury W et al. Development of a rational scale to assess the harm of drugs of potential misuse. Lancet 2007; 369(9566): 1047–1053.

33. Nutt DJ, King LA, Phillips LD et al. Independent Scientific Committee on Drugs. Drug harms in the UK: a multicriteria decision analysis. Lancet 2010; 376 (9752): 1558–1565. Dostupné z DOI: <http://dx.doi.org/10.1016/S0140–6736(10)61462–6>.

34. Hanuš LO, Kotrba Š. Nad léčivými jointy s Lumírem Hanušem. Britské listy [18–09–2008]. Dostupné z WWW: http://blisty.cz/art/42801.html.

35. Holland J (ed). Tráva. Kompletní průvodce světem marihuany v medicíně, vědě, kultuře a politice. Pragma: Praha 2014. ISBN 978–80–7349–408–7

36. Martínez-Pinilla E, Rabal O, Reyes-Resina I et al. Two affinity sites of the cannabinoid subtype 2 receptor identified by a novel homogeneous binding assay. J Pharmacol Exp Ther 2016; 358(3): 580–587. Dostupné z DOI: <http://dx.doi.org/10.1124/jpet.116.234948>.

Štítky
Diabetologie Endokrinologie Interní lékařství

Článek vyšel v časopise

Vnitřní lékařství

Číslo Suppl 3

2016 Číslo Suppl 3

Nejčtenější v tomto čísle

Tomuto tématu se dále věnují…


Kurzy

Zvyšte si kvalifikaci online z pohodlí domova

Diabetická neuropatie a její léčba
nový kurz
Autoři: MUDr. Michal Dubský, Ph.D.

Mnohočetný myelom: Úvodní léčba netransplantovatelných pacientů
Autoři:

Proč v prevenci zubního kazu kartáček nestačí?
Autoři: doc. MUDr. Romana Koberová – Ivančaková, CSc.

Hypersenzitivita dentinu jako příznak poškození tvrdých zubních tkání
Autoři: MUDr. Erika Lenčová, Ph.D.

Cesta pacienta s CHOPN
Autoři: doc. MUDr. Vladimír Koblížek, Ph.D.

Všechny kurzy
Kurzy Doporučená témata Časopisy
Přihlášení
Zapomenuté heslo

Nemáte účet?  Registrujte se

Zapomenuté heslo

Zadejte e-mailovou adresu se kterou jste vytvářel(a) účet, budou Vám na ni zaslány informace k nastavení nového hesla.

Přihlášení

Nemáte účet?  Registrujte se