Vývoj a validace metody pro stanovení ribavirinu v suché kapce krve

Ve středu zájmu farmakokinetické a farmakodynamické analýzy jsou  především účinné a citlivé metody s minimálními náklady. Unikátní  bioanalytickou matricí splňující tyto požadavky jsou suché kapky plné  krve, z nichž je možné stanovit velké množství analytů.

Autoři  americké práce popsali vývoj a validaci metody pro stanovení ribavirinu  v suché kapce krve pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) s reverzní fází a tandemové hmotnostní spektrometrie (MS/MS).

Asi 3mm vzorek ze zaschlé kapky plné krve byl extrahován metanolem za  využití izotopově značeného vnitřního standardu pro HPLC –⁠ MS/MS  analýzu. Validace byla provedena v rozmezí 0,05–10,0 µg/ml. Metoda se  ukázala být dostatečně přesnou (variační koeficient ≤ 15 %) i správnou (rozmezí ± 15 % od kontroly). Tato kritéria byla splněna pro rozmezí  hematokritu 20–54 %, pro střed i okraje vzorku a pro objem vzorku  v rozmezí 10–60 µl. Ribavirin byl ve vzorku stabilní po dobu 140 dnů při pokojové teplotě –20 °C i během tří cyklů jeho zmrazení a rozmrazení. Množství ribavirinu v suché kapce krve významně korelovalo s množstvím  látky v plazmě (r² ≥ 0,98).

Stanovení ribavirinu  v suché kapce krve může být podle předložených výsledků vhodnou a spolehlivou alternativou jeho stanovení v plazmě. To by snížilo nejen  zátěž pacientů, ale i požadavky na personální a technické vybavení či  náklady při provádění farmakokinetických a farmakodynamických studií  s lidskými subjekty.

(the)

Zdroj: Jimmerson L. C., Zheng  J.-H., Bushman L. R., et al. Development and validation of a dried blood spot assay for the quantification of ribavirin using liquid  chromatography coupled to mass spektrometry. J Chromatogr B 2014; 944 : 18–24.