Periferní neuropatie patří mezi nejčastější onemocnění periferního nervového systému u dospělých. Typicky se projevuje paresteziemi, bolestí nebo poruchami čití, přičemž nejčastější příčinou je diabetes mellitus. Kauzální léčba vedoucí k reverzi neuropatie dosud není k dispozici.
Pro propojení nervových buněk a správnou funkci nervového systému je zásadní růst neuritů. Neurotropní vitaminy skupiny B – thiamin (vitamin B1), pyridoxin (vitamin B6) a kobalamin (vitamin B12) – se dlouhodobě používají jako podpůrná léčba neuropatií:
Jednotlivé vitaminy se funkčně nenahrazují, ovšem předpokládá se jejich biochemická synergie. Experimentální studie proto zkoumala, zda kombinace B1, B6 a B12 podporuje růst neuritů výrazněji než jednotlivé vitaminy podané samostatně.
Autoři použili neuronovou buněčnou linii NG108-15 (hybrid myšího neuroblastomu a potkaního gliomu). Buňky byly kultivovány v médiu bez vitaminů B1, B6 a B12. Následně byly exponovány:
Zvolené koncentrace odpovídaly dříve stanoveným optimálním in vitro dávkám. Buňky byly po nasazení léčby sledovány 24 hodin pomocí systému pro živou buněčnou analýzu. Po ukončení inkubace byly buněčné kultury fixovány 4% paraformaldehydem a následně imunocytochemicky zpracovány. Pro vizualizaci neuritických výběžků byl použit neuronový marker βIII-tubulin. Po permeabilizaci buněk a blokování nespecifické vazby byla aplikována primární protilátka proti βIII-tubulinu a následně odpovídající fluorescenčně značená sekundární protilátka.
Kvantitativní hodnocení spočívalo v manuálním měření délky všech identifikovaných neuritů ve zvolených zorných polích pomocí softwaru ImageJ. Hodnocena byla výhradně délka neuritů, nikoliv počet buněk nebo plocha buněčných těl. Data byla analyzována pomocí jednofaktorové analýzy rozptylu (ANOVA) s následným Tukeyho post hoc testem. Za statisticky významné byly považovány hodnoty p < 0,05.
Fluorescenční mikroskopie potvrdila výraznější extenzi neuritů u buněk ošetřených kombinací vitaminů ve srovnání s jednotlivými vitaminy. Průměrná délka neuritů činila:
Kombinace všech 3 vitaminů vedla k relativnímu nárůstu délky neuritů o 51,10 % oproti kontrole bez vitaminů (p < 0,001). Naproti tomu jednotlivé vitaminy nezpůsobily statisticky významné prodloužení neuritů (p > 0,05), přestože byl pozorován numerický nárůst o 2,85 % (B1), 12,11 % (B6), respektive 15,25 % (B12). Efekt kombinace výrazně převyšoval účinek jednotlivých vitaminů – byl 3,35× vyšší než účinek vitaminu B12, 4,22× vyšší než účinek vitaminu B6 a 17,92× vyšší než účinek vitaminu B1. Součet účinků jednotlivých vitaminů nedosahoval efektu kombinace, což podporuje hypotézu synergického působení.
Kombinace vitaminů B1, B6 a B12 vedla v modelu neuronové linie k významnému prodloužení neuritů, zatímco jednotlivé vitaminy podané samostatně statisticky významný efekt neprokázaly. Studie podporuje hypotézu biochemické synergie mezi neurotropními vitaminy skupiny B při podpoře neuritického růstu. Studie však byla provedena v in vitro modelu zdravých neuronů a klinická relevance těchto zjištění vyžaduje další experimentální a klinické ověření.
(lp)
Zdroj: Rayner M. L. D., Ruiz A. J., Viel C. The combination of neurotropic B vitamins (B1, B6, and B12) is superior to individual B vitamins in promoting neurite growth in vitro. In Vitro Cell Dev Biol Anim 2025; 61 (3): 264–267, doi: 10.1007/s11626-025-01024-3.
