Preparation and Use of Tumor Antigen from Pathological Immunoglobulinfor Patients with Multiple Myeloma
Idiotype vaccination can be used as immunotherapy for B-cell malignancies, including multiplemyeloma. Malignant plasma cells produce monoclonal immunoglobulin that can be detected in theserum and/or urine and is tumour-specific. To isolate the myeloma Id protein we used affinity chromatographyon a protein G column. Id was eluted with 0.2M glycine-HCl. The protein was more than 90 %pure as determined by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. Id protein was conjugated with KLHin the presence of 0.1% glutaraldehyde. The conjugation product was administered in the preclinicalexperiment to test vaccination as a part of the clinical protocol under preparation.
Key words: monoclonal immunoglobulin, idiotypic protein, affinity chromatography
Autoři: R. Musilová 1; E. Táborská 2; L. Bourková 1; T. Büchler 1,3; L. Hanák 1; L. Kovářová 1,3; H. Novotná 4; M. Penka 1; R. Hájek 1,3 Působiště autorů: Laboratoř experimentální hematologie a buněčné imunoterapie, Oddělení klinické hematologie, FN Brno, 2Lékařská fakulta MU, Katedra lékařské chemie a biochemie, 3Interní hematoonkologická klinika, FN Brno, 4Oddělení klinické biochemie, FN Brno 1 Vyšlo v časopise: Transfuze Hematol. dnes,, 2002, No. 3, p. 0. Kategorie: Články
Vakcinace idiotypickým (Id) proteinem je jednou z možností imunoterapie B-buněčných malignitvčetně mnohočetného myelomu. Maligní buňky u mnohočetného myelomu produkují monoklonálníimunoglobulin, který nalézáme v séru a moči. Jedná se o tumor-specifické struktury. Izolace Id proteinubyla provedena metodou afinitní chromatografie na protein G koloně s elucí 0,2M glycinem-HCl.SDS-polyakrylamidovou gelovou elektroforézou byla potvrzena více jak 90% čistota získaného proteinu.Id protein byl konjugován s KLH v přítomnosti 0,1% glutaraldehydu a následně použit v preklinickýchpokusech s cílem ověření možné aplikace vakcíny v připravovaném klinickém protokolu.
Klíčová slova: monoklonální imunoglobulin, idiotypický protein, afinitní chromatografie
Zvyšte si kvalifikaci online z pohodlí domova
Nemáte účet? Registrujte se
Zadejte e-mailovou adresu, se kterou jste vytvářel(a) účet, budou Vám na ni zaslány informace k nastavení nového hesla.
