#PAGE_PARAMS# #ADS_HEAD_SCRIPTS# #MICRODATA#

Kvantitativní měření a neutralizační kapacita anti-SARS-CoV-2. Stav v srpnu 2021. Krátké sdělení.


Autoři: B. Friedecký
Vyšlo v časopise: Klin. Biochem. Metab., 30, 2022, No. 1, p. 17-18

V půli srpna 2021 bylo registrováno v Medline vice než 9000 publikací na téma protilátky SARS-CoV-2 a cca 2500 na téma “neutralizační protilátky” u SARS-CoV-2. V červenci 2021 vydala ČSAKI (Česká společnost alergologie a klinické imunologie) pokyny k aplikaci stanovení anti SARS-CoV-2 [1]. Textu doporučení chybí jakýkoliv údaj o analytických a klinických vlastnostech metod stanovení. Z celého textu podle mého názoru výrazně vyniká jeho prvotní účel -⁠ zrovnoprávnění populace plně vakcinovaných jedinců s těmi, kteří COVID-19 již prodělali. Jenže dělat zásadní závěry z výsledků měření a neznat současně jeho potřebné analytické a klinické vlastnosti (preciznost, harmonizaci jednotek, validační postupy, senzitivitu, specifičnost, korelaci s neutralizačními protilátkami) je v naší době velmi zvláštní a dalo by se říci zcestné.

K vyjasnění situace informujeme o doporučení AACC (Americká asociace klinické chemie), publikovaném v časopise Clinical Chemistry 2021 [2]. Zde uvedeme strukturu publikace:

• Antigenní proteiny a vazebná místa

• Třídy protilátek SARS-CoV-2

• Kinetika tvorby protilátek

• Diagnostické testy typu EUA (prozatímní certifikáty FDA)

• Možnost aplikace a limity sérologických stanovení u COVID-19

• Vztah protilátek k diagnostice COVID-19

• Protilátky u dárců plasmy

• Epidemiologie a sérokonverze

• Odpověď po vakcinaci

• Verifikace metod

• Odběr vzorků

• Zacházení s PCR pozitivními a negativními vzorky

• Analytické veličiny měření (preciznost, správnost)

• Vydávání výsledků jako poměru signál/cut-off

• Požadavky akreditace

• Analytická senzitivita a specifičnost

• Stanovení hodnot cut-off

• Kontrola kvality

• Preanalytické podmínky a požadavky

• Klinická interpretace (PPV, NPV)

• Perspektivy standardizace

Jde tedy o řadu zásadních informaci, které rozhodují o možnosti popsat epidemiologickou situaci populace relevantním způsobem. Materiál je vypracován na naše poměry velmi důkladně, což není podle mého názoru na závadu, spíš jde o solidní východiska k další práci a diskusím (zejména u kulatých stolů).

Existuje řada recentních studií o korelaci stanovení anti-SARS-CoV-2 IgG s jejich neutralizačním potenciálem. V současnosti je vyhodnocení této korelace možné demonstrovat například pro kity a platformy Abbott, DiaSorin, Roche, Ortho Vitros [3], SNIBE Maglumi [4], Siemens Advia [5]. 16 různých sérologických stanovení bylo vyhodnoceno v dánské práci [6] a její data uvedena v Tabulce 1.

Možnosti a limity solidní výpovědní hodnoty a smysluplné klinické interpretace výsledků měření anti-SARS -⁠ -CoV-2 IgG jsou dány zejména:

• Dobrou úrovní výsledků validace analytických a klinických parametrů, tedy preciznosti, linearity, senzitivity a specifičnosti vyhovujícím požadavkům CDC (klíčovým požadavkem je senzitivita nad 90 %, specifičnost nad 95 %)

• Korelací výsledků anti SARS-CoV-2 s neutralizačním potenciálem. Ta je u různých diagnostik různá v závislosti na principu detekce RBD (S-protein, N-protein jako cílové antigeny), na tom, co je měřeno (celkové protilátky, IgG, IgM) a na níže uvedeném problému jednotek měření

• Možnost obecného použití anti SARS IgG a celkových protilátek k odhadu neutralizační aktivity je přijímaná řadou autorů a v řadě publikací. Vyšší koncentrace anti SARS-CoV-2 znamenají vyšší neutralizační potenciál.

• Spermanův korelační koeficient mezi anti SARS -⁠ -CoV-2 a PRNT 50 se u různých metod pohybuje v rozmezí cca 0,6-0,85

• Závislost korelace mezi anti SARS-CoV-2 a neutralizační aktivitou (vyjadřovanou hodnotou PRNT 50) je signifikantně závislá zejména na době nástupů symptomů chorob a na závažnosti choroby, ale ne již na pohlaví, věku a dalších faktorech, takže není nezbytné používat k výpočtu korelace multivariantních postupů.

K posouzení kvality stanovení protilátek IgG jsou svou přístupností k dispozici zejména data kontrolního programu RfB Bonn CoVimm. Úspěšnost účastníků ve všech čtyřech vzorcích, dodávaných v jednom kontrolním cyklu se v letech 2020-2021 pohybovala u stanovení anti-SARS-CoV-2 IgG a celkových protilátek v intervalu 78 –⁠ 97 %. Používá se zatím kvalitativního hodnocení vzorků nativních sér vybraných pacientů. Situace, kdy se kvalitativně hodnotí výsledky kvantitativních metod, vypovídá o stavu harmonizace jednotek měření jasně. Vyšší hodnotu úspěšnosti vykázaly cykly s větším počtem vzorků s výraznějšími klinickými symptomy COVID-19 (“oligosymptomatic samples”).

Takže i podle výsledků EHK je zřejmé, že kvalita stanovení není bez problémů. Velký problém kvantifikace výsledků souvisí s neexistující harmonizací jednotek měření. Pregnantní demonstraci této disharmonické situace lze pozorovat velmi přehledně v práci, srovnávající šestnáct kitů v šestnácti laboratořích [6].

Výrazné diference v použitých cílových antigenech, v hodnotách senzitivit a specifičností, obzvlášť výrazné diference v jednotkách měření a podstatně rozdílné kinetiky tvorby protilátek v závislosti na čase odběru a na stupni choroby (Tabulka 1) kvantitativní výsledky silně problematizují. Numerické hodnoty cut-off vyjádřených různými výrobci v cca šesti různých jednotkách jsou o jeden řád rozdílné.

Tab. 1. Summary of selected characteristics of 16 kits for determination of anti-SARS-CoV-2 in August 2021 [6]
Summary of selected characteristics of 16 kits for determination
of anti-SARS-CoV-2 in August 2021 [6]
Explanation: S/C -signal/calibrator, S/CO-signal/cut-off, S/CON- -signal/control, AU/mL, kU/L-quantitative units

Závěrečné poznámky

Dva zásadní problémy jsou v tomto krátkém sdělení zdůrazněny. První se ptá, zda jsou současná kvantitativní měření anti-SARS-CoV-2 skutečně kvantitativní v pravém slova smyslu a zda samotné metody stanovení anti SARS-CoV-2 nevyžadují naléhavě harmonizaci. Druhý se snaží naznačit, že doporučení, postrádající náležitá data o validaci analytických a klinických parametrů stanovení nejsou dostačující a že při publikování klinických doporučení by data o validaci měla být jejich samozřejmou součástí.

Autor prohlašuje, že není ve střetu zájmů.

Do redakce došlo 13. 9. 2021

Adresa pro korespondenci

RNDr Bedřich Friedecký, Ph.D.

Praha 8

Střelničná 1680

e-mail: friedecky@sekk.cz


Zdroje

1. CSAKI. Indikace k vyšetření protilátek proti SARSCoV -⁠ 2. Dostupné z: https://www.csaki.cz.

2. Zhang, V., Wiencek, J., Meng, Q. H. et al. AACC practical recommendation for implementing and interpretation SARS-CoV-2 EUA and LDT serologic testing in clinical laboratories. Clin. Chem., 2021, 67(9), s. 1188-1200.

3. Padoan, A., Bonifate, F., Pagliari, M. et al. Analytical and clinical performances of five immunoassays for the detection of SARS-CoV-2 antibodies in comparison with neutralization activity. EBioMed., 2020, 62, 103101.

4. Padoan, A., Bonifate, F., Cosma, C. et al., Analytical and clinical performances of a SARS-CoV-2 S-RBD IgG assay: comparison with neutralization titers. Clin. Chem. Lab. Med., 2021, 59(8), s. 1444-1452.

5. Irsara, C., Eggerm A. E., Prokopp, W. Clinical validation of the Siemens quantitative SARS-CoV-2 spike IgG assay reveals improved sensitivity and good correlation with virus neuralization titers. Clin. Chem. Lab. Med., 2021, 59(8), s. 1453-1462.

6. Haratshoij, L. H., Gytel-Brask, M., Atzal, S. et al. Comparison of 16 serological SARS-CoV-2 Immunoassays in16 laboratories. J Clin. Microbiol., 2021, 59(5), e02596-20.

Štítky
Biochemie Nukleární medicína Nutriční terapeut

Článek vyšel v časopise

Klinická biochemie a metabolismus

Číslo 1

2022 Číslo 1
Nejčtenější tento týden
Nejčtenější v tomto čísle
Kurzy

Zvyšte si kvalifikaci online z pohodlí domova

Svět praktické medicíny 2/2025 (znalostní test z časopisu)
nový kurz

BONE ACADEMY 2025
Autoři: prof. MUDr. Pavel Horák, CSc., doc. MUDr. Ludmila Brunerová, Ph.D, doc. MUDr. Václav Vyskočil, Ph.D., prim. MUDr. Richard Pikner, Ph.D., MUDr. Olga Růžičková, MUDr. Jan Rosa, prof. MUDr. Vladimír Palička, CSc., Dr.h.c.

Cesta pacienta nejen s SMA do nervosvalového centra
Autoři: MUDr. Jana Junkerová, MUDr. Lenka Juříková

Eozinofilní zánět a remodelace
Autoři: MUDr. Lucie Heribanová

Hypertrofická kardiomyopatie: Moderní přístupy v diagnostice a léčbě
Autoři: doc. MUDr. David Zemánek, Ph.D., MUDr. Anna Chaloupka, Ph.D.

Všechny kurzy
Kurzy Podcasty Doporučená témata Časopisy
Přihlášení
Zapomenuté heslo

Zadejte e-mailovou adresu, se kterou jste vytvářel(a) účet, budou Vám na ni zaslány informace k nastavení nového hesla.

Přihlášení

Nemáte účet?  Registrujte se

#ADS_BOTTOM_SCRIPTS#