#PAGE_PARAMS# #ADS_HEAD_SCRIPTS# #MICRODATA#

Koncentrace fetálních jaderných erytrocytůcirkulujících v periferii gravidních žen proúčely neinvazivní prenatální diagnostiky


Enrichment of Fetal Nucleated Red Blood CellsCirculating in the Peripheral Blood of Pregnant Womenfor the Purpose of Non-invasive Prenatal Diagnosis

Objective:
Enrichment of nucleated red blood cells (NRBCs) from maternal blood for non-invasiveprenatal diagnosis.Design: Pilot study.Setting: 2 nd Clinic of Paediatrics, University Hospital Motol, Prague, Czech Republic.Methods: Mononuclear cells were isolated from 13 -⁠ 28 ml of peripheral maternal blood between 13and 37 weeks of gestation. Leukocytes from maternal peripheral blood were depleted from mono-nuclear cells by treatment with anti-CD14 and anti-CD45 microbeads and high-gradient magneticcell separation (MACS) on VarioMACS. NRBCs were sorted from CD14 -⁠ /CD45 -⁠ fraction by positiveselection using anti-CD71 microbeads on MiniMACS. All sorting steps were analysed by three-co-lour cytometric analysis with FACScan flow cytometer.Results: In 68 out of 78 pregnant woman (87 %) NRBCs were found in range 2x10 5 -⁠ 1,02 x 10 6.NRBC were enriched with an average enrichment rate of 138-fold ranging from 4 -⁠ 526 fold. In ourcohort of pregnant woman the number of isolated NRBCs was individual. We identified NRBCsfrom the 13 th week of gestation.Conclusion: The aim of the study is to establish and standardise the method of enrichment ofNRBCs from maternal blood samples and verify the applicability of this alternative source fornon-invasive prenatal diagnosis.

Key words:
nucleated red blood cells, high-gradient magnetic cell separation (MACS), flow cyto-metry (FACS), prenatal diagnosis, fetal cells.


Autoři: I. Hromadníková 1;  Lenka Sedláčková 2 ;  M. Mrštinová 3;  K. Štechová 1;  KaramanovS. 5;  J. Kofer 5;  M. Macek 4
Působiště autorů: II. dětská klinika 2. LF UK, FN Motol, Praha, přednosta doc. MUDr. J. Vavřinec, CSc. 2 Laboratoř imunologie, KlinLab, Praha 3 Gynek. -porod. klinika FN Motol, Praha, přednosta doc. MUDr. K. Citterbart, CSc. 4 Oddělení lékařské genetiky, FN Motol, Praha, p 1
Vyšlo v časopise: Ceska Gynekol 2000; (1): 33-37
Kategorie: Články

Souhrn

Cíl studie:
Koncentrace jaderných erytroblastů cirkulujících v periferní krvi gravidních žen proúčely neinvazivní prenatální diagnostiky.Typ studie: Pilotní studie.Název a sídlo pracoviště: II. dětská klinika 2. LF UK, Fakultní nemocnice Motol, Praha, Českárepublika.Metodika: Z 13 -⁠ 28 ml periferní krve 78 gravidních žen v rozmezí 13. -⁠ 37. týdnu gravidity bylyizolovány mononukleární buňky. Mateřské leukocyty byly odstraněny z frakce mononukleárníchbuněk pomocí anti-CD14 a anti-CD45 monoklonálních protilátek značených superparamagnetic-kými částicemi metodou magnetické separace buněk (MACS) na zařízení VarioMACS. Jadernéerytroblasty byly následně koncentrovány z CD14 -⁠ /CD45 -⁠ frakce pozitivní selekcí pomocí anti-CD71 monoklonální protilátky na zařízení MiniMACS. Jednotlivé frakce byly analyzovány tříba-revnou analýzou na průtokovém cytometru (FACS).Výsledky: U 68 těhotných žen z 78 testovaných (87 %) byly nalezeny po dvojité magnetické separa-ci buněk (doubleMACS) zahrnující depleci leukocytů a pozitivní selekci jaderné erytroblastyv rozmezí 2x10 5 -⁠ 1,02 x 10 6 . Faktor celkového zkoncentrování se pohyboval v rozmezí 4,2 -⁠ 526,0(Ć 138,4). Z našeho souboru vyšetřených je patrné, že počet CD71 + jaderných erytroblastů koncen-trovaných metodou doubleMACS je značně individuální. Jaderné erytroblasty cirkulující v krev-ním oběhu gravidních žen bylo možno zkoncentrovat již v 13. týdnu gravidity.Závěr: Naším cílem je vypracovat a standardizovat metodu koncentrace jaderných erytroblastůcirkulujících v periferii gravidních žen a ověřit možnost použití tohoto alternativního zdroje proúčely neinvazivní prenatální diagnostiky.

Klíčová slova:
jaderné erytroblasty, MACS, FACS, prenatální diagnostika, fetální buňky

Plné znění tohoto článku není v digitalizované podobě.
V případě zájmu kontaktujte NTO ČLS JEP, které vám může poskytnout sken časopisu.

Štítky
Dětská gynekologie Gynekologie a porodnictví Reprodukční medicína

Článek vyšel v časopise

Česká gynekologie


2000 Číslo 1
Nejčtenější tento týden
Nejčtenější v tomto čísle
Kurzy

Zvyšte si kvalifikaci online z pohodlí domova

Svět praktické medicíny 2/2025 (znalostní test z časopisu)
nový kurz

BONE ACADEMY 2025
Autoři: prof. MUDr. Pavel Horák, CSc., doc. MUDr. Ludmila Brunerová, Ph.D, doc. MUDr. Václav Vyskočil, Ph.D., prim. MUDr. Richard Pikner, Ph.D., MUDr. Olga Růžičková, MUDr. Jan Rosa, prof. MUDr. Vladimír Palička, CSc., Dr.h.c.

Cesta pacienta nejen s SMA do nervosvalového centra
Autoři: MUDr. Jana Junkerová, MUDr. Lenka Juříková

Eozinofilní zánět a remodelace
Autoři: MUDr. Lucie Heribanová

Hypertrofická kardiomyopatie: Moderní přístupy v diagnostice a léčbě
Autoři: doc. MUDr. David Zemánek, Ph.D., MUDr. Anna Chaloupka, Ph.D.

Všechny kurzy
Kurzy Podcasty Doporučená témata Časopisy
Přihlášení
Zapomenuté heslo

Zadejte e-mailovou adresu, se kterou jste vytvářel(a) účet, budou Vám na ni zaslány informace k nastavení nového hesla.

Přihlášení

Nemáte účet?  Registrujte se

#ADS_BOTTOM_SCRIPTS#