FLUORESCENČNÍ IN SITU HYBRIDIZACE (FISH) V DIAGNOSTICEDĚTSKÝCH AKUTNÍCH LYMFATICKÝCH LEUKÉMIÍ (ALL)

Overview

Přesná analýza karyotypu leukemických buněk hraje významnou roli při diagnostice, klasifikaci, stanoveníprognózy a monitorování léčby nemocných s leukémiemi. U dětských ALL byla popsána řada specifických chro-mozómových aberací, které mají velký prognostický význam. K nejdůležitějším patří hyperdiploidie s více než 50chromozómy a t(12;21), které jsou považovány za příznivý prognostický faktor a t(9;22) a přestavby MLL genu,které korelují se špatnou prognózou. Proto je včasná a přesná detekce těchto aberací velmi důležitá. Metody FISHpřekonávají některá omezení metod konvenční cytogenetiky a molekulární genetiky a díky své citlivosti umožňujídetekovat specifické chromozómové aberace v mitózách i v nedělících se interfázních jádrech. K detekci hyperdi-ploidních buněčných klonů a strukturních přestaveb používáme dvoubarevnou fluorescenci s centromerickými,respektive lokus-specifickými sondami. K analýze složitých komplexních přestaveb používáme malovací sondya mnohobarevnou fluorescenční in situ hybridizaci (mFISH). Během posledních 8 let jsme různými metodamivyšetřili celkem 275 dětí s ALL. Translokaci t(9;22) jsme nalezli u sedmi a přestavby MLL genu u 14 nemocnýchz tohoto souboru. Detekcí hyperdiploidních buněk a t(12;21) se zabýváme od roku 1988. Buňky s vysokou hyper-diploidií jsme detekovali u 35 pacientů, 10 z nich mělo v karyotypu další komplexní přestavby. Translokaci t(12;21)jsme detekovali u 37 nemocných a komplexní přestavby jsme prokázali u 22 z nich. FISH se spolu s cytogenetikoua molekulární genetikou stala v dnešní době nezbytnou součástí laboratorních vyšetření u dětí s ALL, a to nejen přidiagnostice, ale i v průběhu léčby.

Klíčová slova:
dětské ALL, FISH, konvenční cytogenetika, molekulárně-genetické metody, mFISH.