In vitro kultivace mezenchymových kmenovýchbuněk u pacientů s lymfoidními malignitami

Overview

Úvod.
Mezenchymové kmenové buňky (MSC) jsou v současné době intenzivně zkoumány pro svéschopnosti podpory krvetvorby, modulace imunitních funkcí (včetně GVH nemoci) a diferenciacesměrem ke specializovaným tkáním (chrupavka, kost, hladké svalstvo).V naší laboratoři jsme zkoumalirůstové vlastnosti mezenchymových kmenových buněk u pacientů s lymfoidními malignitami. Materiálya metody. 10 ml kostní krve bylo odebráno pacientům podstupujícím rutinní diagnostickou čikontrolní trepanobiopsii kostní dřeně. Po separaci mononukleárních buněk (MNC) byl spočten početadherujících MNC a fibroblastů na 105 celkových MNC. Mezenchymové buňky byly pěstovány v kompletnímmédiu (α-MEM + 20% fetální telecí sérum+ glutamin + antibiotika).Hodnocen byl počet koloniíz 1. pasáže (na 105 buněk kostní krve, CFU-F1), počet MSC vypěstovaných z 1. pasáže a počet mezenchymovýchkolonií vypěstovaných ze 2. pasáže (CFU-F2) po nasazení v koncentraci 1.5, 3, 5 a 10buněk/cm2. Výsledky. Celkem bylo odebráno 44 pacientů, z toho 15 oboustranně. Počet kolonií z 1.pasáže signifikantně koreloval pouze s počtem adherujících fibroblastů. Počet kolonií z 2. pasáževykazoval zhruba lineární závislost na koncentraci nasazených buněk a koreloval s diagnózou pacienta(pacienti s chronickou lymfadenózou a mnohočetným myelomem měli výrazně více sekundárníchkolonií než pacienti s lymfomy). U pacientů s oboustrannými odběry bylo dosaženo velmi dobrýchkorelací v počtu adherujících MNC, adherujících fibroblastů a primárních i sekundárních kolonií.Závěr. Podařilo se zavést spolehlivou a reprodukovatelnou metodu stanovení počtu MSC v kostní dřenipacientů s lymfoidními malignitami. Lepší růst MSC u pacientů s myelomem a CLL může být způsobenodlišným profilem sekrece cytokinů těmito buňkami a může se podílet na patogenezi uvedenýchonemocnění.

Klíčová slova:
mezenchymová kmenová buňka, lymfom, lymfatická leukémie, myelom