Identifikace přenašeček Duchenneovy a Beckerovysvalové dystrofie metodou fluorescenční in situhybridizace

Duchenneova a Beckerova svalová dystrofie (DMD/BMD) jsou na X chromosom vázaná recesivnědědičná onemocnění způsobená mutacemi v genu, který kóduje protein dystrofin. U přibližně65 % pacientů postižených DMD a BMD se zjistí velká intragenová delece v dystrofinovém genu.Matky postižených chlapců jsou asi ve dvou třetinách případů přenašečkami příslušné mutacev dystrofinovém genu. U postižených probandů se detekce delecí v dystrofinovém genu rutinněprovádí metodami vícenásobné polymerázové řetězové reakce (mPCR), RT-PCR (reverzně transkriptázové PCR) s testem na zkrácený protein (PTT - protein truncation test) či Southern blottingem. Detekce delecí u přenašeček je komplikována přítomností kopie genu pro dystrofin nadruhém chromosomu X. V naší studii prezentujeme diagnostickou strategii, která využívá metodufluorescenční in situ hybridizace (FISH) pro detekci přenašeček DMD/BMD. Použili jsme set šestikosmidových prob na detekci nejčastěji deletovaných oblastí dystrofinového genu získaných z oddělení lékařské genetiky Leidenské Univerzity (Department of Human Genetics, Leiden University Medical Center). Vyšetřili jsme 14 matek probandů, u nichž byla metodou mPCR neboRT-PCR/PTT zjištěna a definována delece v dystrofinovém genu. Ve 4 případech byla matka postiženého probanda identifikována jako přenašečka delece v dystrofinovém genu. U čtyř zdravýchžen kontrolní skupiny jsme neprokázali delece ve vyšetřovaných exonech. Žádný ze získanýchvýsledků nebyl v rozporu s výsledky mPCR či RT-PCR/PTT. Na základě našich výsledků jsmedospěli k závěru, že fluorescenční in situ hybridizace je efektivní a přímou metodou pro identifikaci přenašeček delecí v dystrofinovém genu a navrhujeme ji jako metodu první volby v diagnostice přenašeček DMD/BMD.

Klíčová slova:
Duchenneova svalová dystrofie (DMD) - delece - FISH